PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的四要素。
1試劑準(zhǔn)備區(qū)。
用于備考試劑。該區(qū)域?yàn)檎龎?，目的是防止污染物溢出。該區(qū)域內(nèi)部分為普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域、PCR試劑的準(zhǔn)備區(qū)域和PCR主反應(yīng)液的準(zhǔn)備區(qū)域。在普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)準(zhǔn)備樣品核酸提取時(shí)所需的分解液、提取液等PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)域用于PCR試劑的制備和保存。例如準(zhǔn)備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染，避免反復(fù)冷凍和解凍，試劑貯藏溶液應(yīng)平均為小作業(yè)體積，貯藏在該房間后，PCR主反應(yīng)液準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行主反應(yīng)混合液(樣品除外)。將所有PCR所需試劑混合)添加到PCR管的操作中。重要提示:不得將其他房間的材料(包括擴(kuò)張、模板和目標(biāo)核酸或陽性對照、供應(yīng)品或設(shè)備)帶入試劑準(zhǔn)備區(qū)。
2樣品準(zhǔn)備區(qū)。
該區(qū)域無壓力設(shè)置要求。該區(qū)域用于分樣，研磨、粉碎、均勻漿料。這些粉碎、研磨和均漿處理過程中可能會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，因此陽性樣品可能會(huì)污染后續(xù)操作。該區(qū)與后區(qū)嚴(yán)格隔離，應(yīng)放置在與后三區(qū)隔離的獨(dú)立房間內(nèi)。在樣品準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)也可以設(shè)置專用的封閉區(qū)域和房間來接收和儲(chǔ)藏樣品。這個(gè)房間可以放冰箱儲(chǔ)藏樣品，應(yīng)該和樣品準(zhǔn)備區(qū)的其他區(qū)域隔離。樣品備用區(qū)的人員不得進(jìn)入試劑備用區(qū)。
3核酸提取區(qū)。
核酸提取區(qū)是進(jìn)行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準(zhǔn)備區(qū)域包括從樣品中提取核酸和純化的區(qū)域和將核酸添加到包括PCR主反應(yīng)混合液管的操作區(qū)域。添加樣品后，PCR管蓋應(yīng)盡快蓋上。使用PCR板和蓋板時(shí)，陽性對照和含有目標(biāo)序列的樣品應(yīng)與待測樣分開操作，以免模板添加時(shí)造成交叉污染。
重要提示:該房間的所有物品都不得帶試劑準(zhǔn)備區(qū)。
4擴(kuò)大和產(chǎn)品檢測區(qū)域。
該區(qū)域用于擴(kuò)大PCR和分析PCR。PER儀放在這個(gè)區(qū)域。房間保持負(fù)壓，目的是防止核酸溢出。在這個(gè)地區(qū)，人們必須一直穿工作服。
手套和離開房間前脫離，防止擴(kuò)張子污染其他地方。所有用于擴(kuò)張和產(chǎn)品檢測的設(shè)備都應(yīng)指定用于該房間。PCR分析]二作也設(shè)置在該區(qū)域，例如酶切割、序列、克隆等，但實(shí)驗(yàn)室必須盡量將這些活動(dòng)分隔到不同的區(qū)域和不同的房間。降低擴(kuò)大產(chǎn)品的污染風(fēng)險(xiǎn)。如果沒有條件在該區(qū)域設(shè)置負(fù)壓，該區(qū)域必須設(shè)置排風(fēng)裝置。
重要提示:該房間的物品不得帶樣品準(zhǔn)備區(qū)或試劑準(zhǔn)備區(qū)。
